Mrlja po Gramu: kako se pravi i za što služi

Sadržaj

• Kako se vrši mrlja po Gramu
• Čemu služi

Gramova mrlja, ili jednostavno Gram, brza je i jednostavna tehnika koja ima za cilj razlikovanje bakterija prema karakteristikama njihove stanične stijenke nakon izlaganja različitim bojama i otopinama.

Dakle, pomoću bojenja po Gramu moguće je, osim oblika bakterija, provjeriti i boju koju oni dobivaju, a ovaj je rezultat važan za definiranje drugih strategija za identificiranje bakterijskih vrsta i za liječnika da ukaže na preventivni tretman prema mikroskopski promatranim karakteristikama.

Bojenje grama obično se radi rutinski u laboratoriju i dio je pregleda za bakterioskopiju. Shvatite što je bakterioskopija i kako se to radi.

Kako se vrši mrlja po Gramu

Mrlja po Gramu brza je, praktična i jeftina metoda za identificiranje bakterija odgovornih za infekcije, a korisna je za liječnike da ukažu na preventivni tretman infekcije koja se može dogoditi, budući da su poznate specifične karakteristike ovih skupina bakterija,

Bojenje po Gramu vrši se u 7 glavnih koraka, no protokol se može razlikovati ovisno o laboratoriju:

1. Stavite nekoliko kolonija bakterije na stakalce, dodajući kap vode kako biste olakšali homogenizaciju kolonija;
2. Pustite da se malo osuši i oštrica može brzo proći kroz plamen kako bi pogodovala sušenju, međutim važno je obratiti pažnju na temperaturu, jer ako je temperatura previsoka moguće je da dođe do promjene u strukturi bakterije, koje mogu ometati rezultat ispitivanja;
3. Kad se dijapozitiv osuši, prekrijte bojom kristalnog ljubičastog i pustite da djeluje oko 1 minute;
4. Oprati stakalce mlazom tekuce vode i pokriti ga lugolom, koji ima za cilj fiksiranje plave boje, i pustiti da djeluje 1 minutu. Obje vrste bakterija mogu apsorbirati kompleks koji čine boja i lugol, postajući plavi;
5. Zatim operite tobogan tekućom vodom i nanesite 95% -tni alkohol, ostavljajući da djeluje 30 sekundi. Alkohol je odgovoran za otapanje lipidne membrane koja stvara gram negativne bakterije i, na taj način, uklanjanje kompleksa nastalog između boje i lugola, obezbojenje tih bakterija. Međutim, u slučaju gram-pozitivnih bakterija, alkohol dehidrira staničnu stijenku gram-pozitivnih bakterija, uzrokujući sužavanje pora i čineći ih nepropusnim;
6. Zatim ponovno operite u tekućoj vodi i pokrijte stakalce drugom bojom, fuksinom ili safraninom i pustite da djeluje 30 sekundi;
7. Zatim tobogan operite pod mlazom vode i pustite da se osuši na sobnoj temperaturi.

Čim se stakalce osuši, moguće je staviti kap uranjajućeg ulja i promatrati predmetno staklo pod mikroskopom sa objektivom od 100x, a moguće je provjeriti prisutnost ili odsutnost bakterija, kao i prisutnost kvasca i epitela Stanice.

Čemu služi

Glavni cilj bojanja po Gramu je razlikovanje bakterija prema karakteristikama stanične stijenke i općoj morfologiji. Prema tome, prema karakteristikama opaženim pod mikroskopom, bakterije se mogu klasificirati na:

• Gram-pozitivne bakterije, koji se vizualiziraju plavom bojom zbog činjenice da ih alkohol ne mijenja, budući da imaju deblju staničnu stijenku i pore im se sužavaju kada su izloženi lugolu;
• Gram negativne bakterije, koji se vizualiziraju ružičastom / ljubičastom bojom zbog činjenice da su obezbojeni alkoholom i obojeni safraninom ili fuksinom.

Nakon gledanja bakterija pod mikroskopom, moguće je da će se u laboratoriju provesti daljnja ispitivanja kako bi se identificirale vrste bakterija. Međutim, putem Grama i povezanosti sa znakovima i simptomima koje osoba predstavlja, liječnik može ukazati na preventivni tretman dok ne postanu dostupni rezultati konkretnijih pregleda, jer je na taj način moguće smanjiti stopu replikacije bakterija i spriječiti komplikacije.